本标准规定了测定水中浮游植物的滤膜-显微镜计数法。本标准适用于地表水中浮游植物的快速测定。
当样品最大过滤体积为1000 ml时，方法检出限为40 cells/L。方法检出限计算方法详见附录A。
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GB/T 14581水质 湖泊和水库采样技术指导
HJ/T 91地表水和污水监测技术规范
HJ 494水质 采样技术指导
下列术语和定义适用于本标准。
3.1
浮游植物phytoplankton
在水中营浮游生活的微小藻类植物，通常浮游植物就是浮游藻类，包括原核的蓝藻和其它各类真核藻类。
3.2
计数单位counting unit
显微镜视野下选择计数的最小单元，如细胞。
3.3
浮游植物密度density of phytoplankton
单位体积内浮游植物的细胞数，cells/L。
3.4
显微镜计数视野microscope counting field
显微镜视野中限定一定面积的区域，用来定量计数浮游植物。
样品通过一定孔径的滤膜，群体、丝状体及单细胞浮游植物截留在滤膜上，滤膜经透明处理后在显微镜下镜检。
除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的去离子水或蒸馏水。
5.1碘（I2）。
5.2碘化钾（KI）。
5.3甲醛溶液：w(HCHO)＝37%～40%。
5.4鲁哥氏碘液：
称取60 g碘化钾（5.2）溶解在100 ml水中，再加入40 g碘（5.1），充分搅拌使其完全溶解，加水定容至1000 ml，转移至棕色磨口玻璃瓶，室温避光保存。
5.5显微镜浸没油：nD23=1.515或nE23=1.518，配透明玻璃滴棒。
5.6滤膜：混合纤维素酯膜，直径25 mm，孔径0.45μm～3μm。
注：每批次滤膜应进行水化测试和油透明测试，满足可水化和可透明要求后方可使用。将1张未使用的滤膜放入盛水的烧杯中，若滤膜被水完全浸润，则滤膜可水化。取1张未使用的滤膜，置于滴有显微镜浸没油的载玻片上， 若滤膜被浸没油完全浸润，则滤膜可透明。
6.1 25号浮游生物网：网孔直径0.064 mm，网呈圆锥形，网口套在铜环上，网底端有出水开关活塞。
6.2定性采样瓶：30 ml～100 ml广口聚乙烯瓶。
6.3采水器：不锈钢或有机玻璃材质，圆柱形。容量和深度规格要满足采样要求。
6.4定量采样瓶：1 L～2 L广口聚乙烯瓶。
6.5冷藏箱。
6.6真空抽滤装置：包括漏斗（直径25 mm，容积200 ml）、多孔聚酯滤膜支撑板、收集瓶、真空泵（相对真空度≤－17 kPa，可调）。
6.7载玻片：25 mm×76 mm。
注：载玻片和盖玻片使用前应用浓盐酸和乙醇浸泡。若条件允许，选择可直接使用的载玻片或盖玻片。
6.8盖玻片：25 mm×25 mm。
6.9无齿组织镊子。
6.10载玻片晾片板：适配同规格载玻片。
6.11烘箱：70℃±2℃，温度可调。
6.12正置生物显微镜或倒置生物显微镜：物镜4×、10×、20×、40×；目镜10×或15×。
6.13载物台测微计：又称镜台测微计，1 mm/100 DIV，分划值为0.01 mm。
注：DIV指等分格，1 mm/100 DIV即1 mm等分成100格。
6.14惠普尔目镜分划板（Whipple grid）：边长为7 mm～10 mm的正方形大格，划分为100个相同的正方形中格，位于中央的1个中格进一步划分为25个相同的正方形小格。
注：不具备惠普尔目镜分划板时，亦可使用同规格的网格型目镜分划板（即中央的中格未细分为25小格的网格型目镜分划板）。
6.15计数器。
6.16一般实验室常用设备。
7.1样品采集
7.1.1定性样品
点位布设及采样频次按照GB/T 14581、HJ/T 91和HJ 494的相关规定执行。
使用25号浮游生物网（6.1）采集定性样品。关闭浮游生物网底端出水活塞开关，在水面表层至0.5 m水深处以20 cm/s～30 cm/s的速度做“∞”形往复，缓慢拖动约1 min～3 min，待网中明显有浮游植物进入，将浮游生物网（6.1）提出水面，网内水自然通过网孔滤出，待底部剩少许水样（5 ml～10 ml）时，将底端出口移入定性采样瓶（6.2）中，打开底端活塞开关收集定性样品。采集分层样品时，用25号浮游生物网（6.1）过滤特定水层样品，其他步骤同采集表层样品。定性样品采集完成后及时将浮游生物网清洗干净。样品采集后放入冷藏箱（6.5）冷藏避光运输。
如有定性样品采集技术规范，按技术规范有关要求执行。
7.1.2定量样品
按照GB/T 14581、HJ/T 91和HJ 494的相关规定采集定量样品。
使用采水器（6.3）采集1 L～2 L样品至定量采样瓶（6.4）中。若水体透明度较高，浮游植物数量较少时，应酌情增加采样体积。定量样品采集完成后，定量采样瓶（6.4）不应装满，以便摇匀。
注1：有些浮游植物（如蓝藻）常上浮在水面或成片、条带分布，可在此水华密集区域采样作为峰值参考。注2：定量样品采集应在定性样品采集之前。应保持固定时间段采样，以便结果之间可相互比较。
7.2样品保存
7.2.1定性样品
定性样品采集后应立即加入鲁哥氏碘液（5.4）固定，用量为水样体积的1.0%～1.5%。镜检活体样品不加鲁哥氏碘液（5.4）固定。定性样品在室温避光条件下可保存3周；1℃～5℃冷藏避光条件下可保存12个月。活体样品4℃～10℃冷藏避光条件下可保存36 h。
7.2.2定量样品
定量样品采集后立即加入鲁哥氏碘液（5.4）固定，用量为水样体积的1.0%～1.5%。也可将鲁哥氏碘液（5.4）提前加入定量采样瓶（6.4）中带至现场使用。定量样品在室温避光条件下可保存3周；1℃～5℃冷藏避光条件下可保存12个月。
样品在保存过程中，应每周检查鲁哥氏碘液（5.4）的氧化程度，若样品颜色变浅，应向样品中补加适量的鲁哥氏碘液（5.4），直到样品的颜色恢复为黄褐色。
注：若样品需长期保存，应加入甲醛溶液（5.3），用量为水样体积的4%。
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