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GB/T 7918.3-1987 化妆品微生物标准检验方法 粪大肠菌群

      粪大肠菌群细菌来源于人和温血动物的粪便。检出粪大肠菌群表明该化妆品已被粪便污染,有可能存在其他肠道致病菌或寄生虫等病原体的危险。因此粪大肠菌被列为重要的卫生指标菌。

1 方法提要

      根据粪大肠菌群所具有的生物特性,如革兰氏阴性无芽胞杆菌在44℃培养24~48h能发酵乳糖产酸并产气,能在选择性培养基上产生典型菌落,能分解色氮酸产生靛基质。

2 培养墓和试剂

2.1 乳糖胆盐培养基

      成分:蛋白陈                      20g

                猪胆盐                       5g

                乳糖                          5g

       0.4%溴甲酚紫水溶液       2.5ml

      蒸馏水                           1000ml

      制法:将蛋白陈、胆盐及乳糖溶于蒸馏水中,调pH到7.4,加入指示剂,混匀,分装试管(每支试管中加一个小倒管)。115℃(10 lb)20min灭菌。

2.2 双倍浓度乳糖胆盐培养基

      按上述乳糖胆盐培养基成分,燕馏水量不变,其他成分量加倍。

2.3 伊红美蓝(EMB)琼脂

      成分:      蛋白陈       10g

                乳糖         10g

          磷酸氢二钾       2g

            琼脂             20g

  2%伊红水溶液       20ml

0.5%美蓝水溶液       13ml

蒸馏水                  1000ml

      制法:先将琼脂加到900 ml蒸馏水中,加热溶解,然后加入磷酸氢二钾蛋白陈,混匀,使之溶解。再以蒸馏水补足至1000ml。校正pH值为7.2-7.4,分装于烧瓶内,121℃ (15 lb) 15 min高压灭菌备用。临用时加入乳糖并加热融化琼脂。冷至60℃左右以无菌手续加入灭菌的伊红美蓝溶液,摇匀。倾注平皿备用。

 

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